A、获取目的基因时可能用到限制性内切酶，A正确；B、DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来，B错误；C、目的基因须有运载体导入受体细胞，C正确；D、最后需要检测目的基因是否已成功表达，D正确．故选：B．
